L.S. Differential Medium Дифференциальная среда L.S. (для молочнокислых бактерий)

M582

Среду L.S. (Lactobacillus-Streptococcus) используют для обильного роста и дифференциации лактобактерий и стрептококков по культуральным свойствам, восстановлению ТТХ и казеиновой реакции.

Состав**:

Ингредиенты	грамм/литр
Гидролизат казеина	10,00
Папаиновый перевар соевой муки	5,00
Мясной экстракт	5,00
Дрожжевой экстракт	5,00
Глюкоза	20,00
Натрия хлорид	5,00
L-Цистеина гидрохлорид	0,30
Агар-агар	15,00
Конечное значение рН (при 25°С) 6,1 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Тщательно размешать 65,3 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С и асептично добавить следующие стерильные растворы, предварительно выдержанные при 50°С:

100 мл 10%-ного (вес/об) водного раствора тонкого молочного порошка без антибиотиков, стерилизованного автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 5 мин

10 мл раствора трифенилтетразолия хлорида (ТТХ, FD057).

Тщательно размешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Принцип и оценка результата:

Эта среда предложена Eloy и Lacrosse (1) для обильного роста и дифференциации лактобактерий и стрептококков из йогурта. Йогурт производят при контролируемом ферментировании молока закваской из Streptococcus thermophilus и Streptococcus bulgaricus при 43°С. Указанные микроорганизмы находятся в симбиотических отношениях. Стрептококки растут первыми и снижают окислительно-восстановительный потенциал среды, позволяя размножаться лактобактериям, которые, в свою очередь, продуцируют вещества, стимулирующие рост стрептококков и придающие йогурту характерный аромат (2).

Соотношение Streptococcus thermophilus и Streptococcus bulgaricus в стартовой культуре и в конечном продукте определяет такие важные факторы, как аромат и кислотность йогурта. Ряд автором рекомендовали соотношение 1:1 (3, 4, 5).

Образцы йогурта или стартовых культур вносят в расплавленную и остуженную среду LS, тщательно перемешивают и разливают в чашки, которые затем инкубируют при 43°С в течение 48 ч. После инкубирования можно подсчитывать общее количество микроорганизмов или раздельно стрептококков и лактобактерий.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет светло-желтую окраску, опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (6,53% вес/об) имеет рН 6,1 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 48 ч при 43°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Характер роста
Lactobacillus bulgaricus (41842)	Красные шероховатые (ризоидные) с зоной помутнения
Streptococcus thermophilus (14485)	Красные гладкие с зоной просветления

Ссылки:

1. Eloy C. and Lacrosse R., 1976, Bull. Rech. Agron Gembloux, 11(1-2):83.
2. Davis J.G., Ashton T.F. and McCaskill M., 1971, Dairy Ind., 36:569.
3. Pette J.W. and Lolkema H., 1950, Neth. Milk Dairy J., 4:261.
4. Stocklin P., 1969, Cultured Dairy Prod. J., 4 (3), 6.
5. Sellars R.L. and Babel F. J., 1970, “Cultures for the Manufacture of Dairy Products”, Chr. Hansens’s Laboratory, Inc., Milwankee, Wis.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.