Забуференный дрожжевой агар
Buffered Yeast Agar | M585 |
Эта полусинтетическая среда используется для культивирования дрожжевых и плесневых грибов, а также для микробиологического контроля качества мытья посуды для безалкогольных напитков и других материалов.
Состав**:
Ингредиенты | Грамм/литр |
|---|---|
Дрожжевой экстракт | 5,00 |
Глюкоза | 20,00 |
Аммония сульфат | 0,72 |
Аммония дигидрофосфат | 0,26 |
Агар-агар | 15,00 |
Конечное значение рН (при 25°С) 5,5 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 41,0 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 0,75 атм (115°С) в течение 20 мин.
Принцип и оценка результата:
Забуференный дрожжевой агар является модификацией дрожжевой среды, описанной Davis (1). Необходимое значение рН можно установить, добавляя лимонную или молочную кислоту в стерильную среду. Ниже приводится таблица с данными о количестве указанных кислот, которое надо добавить к 100 мл расплавленного и остуженного до 50°С забуференного дрожжевого агара.
Количество кислоты (мл), добавляемой к 100 мл среды для получения заданного значения рН
Требуемое значение рН | Лимонная кислота (моногидрат, 1% вес/об) | Молочная кислота (1% вес/об) |
|---|---|---|
4,75 | 1,26 | 0,125 |
4,50 | 2,24 | 0,20 |
4,25 | 3,92 | 0,30 |
4,00 | 6,16 | 0,45 |
3,75 | 9,52 | 0,70 |
3,50 | 14,56 | 1,17 |
Практичный метод оценки качества мытья (очистки) бутылок описал Bunker (2, 3). В соответствии с ним, бутылка покрывается слоем питательной среды изнутри и служит своеобразной посудой для «вращающейся культуры». Когда агар застывает, бутылку инкубируют и затем изучают рост, подсчитывают колонии микроорганизмов. Этот метод дает более корректные результаты, по сравнению с методом ополаскивания и последующего посева смывов. При использовании забуференного дрожжевого агара с этой целью, его концентрацию до стерилизации рекомендуется повысить до 1% (вес/об).
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет светло-янтарную окраску, прозрачный или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (4,1% вес/об) имеет рН 5,5 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 48-72 ч при 30°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост* |
|---|---|
Aspergillus niger (16404) | Обильный |
Sacharomyces cerevisiae (9763) | Обильный |
Candida albicans (10231) | Обильный |
Ссылки:
1. Davis J.G., 1931, J. Dairy Res., 3:133.
2. Bunker H.J., 1952, Lab. Prac., 18:354.
3. Bunker H.J., 1956, Wallerstein Lab. Communications, 19(65):143.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.