Тетразолиевый агар с кристаллвиолетом для психротрофов
Crystal Violet Tetrazolium Agar | М586 |
Среду используют для определения грамотрицательных психротрофных бактерий, вызывающих порчу пищевых продуктов.
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Гидролизат казеина | 5,00 |
Дрожжевой экстракт | 2,50 |
Глюкоза | 1,00 |
Кристаллический фиолетовый | 0,001 |
Агар-агар | 15,00 |
Конечное значение рН (при 25°С) 7,0 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 23,5 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С и асептично добавить 5 мл стерильного 1%-ного раствора 2, 3, 5-Трифенилтетразолия хлорида (добавка FD057). Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.
Принцип и оценка результата:
Эта среда основана на прописи, предложенной Olson (1), и рекомендована АРНА (2) для определения грамотрицательных психротрофных бактерий, вызывающих порчу пищевых продуктов. Виды Achromobacter, Alcaligenes, Flavobacterium и Pseudomonas относят к психротрофным, так как они имеют температурный оптимум роста ниже 20°С (3). Многие психротрофные микроорганизмы в случае массивного размножения могут вызывать изменение органолептических свойств (порчу) пищевых продуктов. Темпы их роста, и, следовательно вероятность порчи, например, охлаждаемых продуктов, существенно зависят от температуры хранения (3, 4).
Гидролизат казеина и дрожжевой экстракт дают различные азотсодержащие питательные вещества, глюкоза – источник углерода и энергии. Кристаллвиолет заметно подавляет рост грамположительных микроорганизмов, не оказывая влияния на психротрофные микробы, которые являются преимущественно грамотрицательными.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий серо-желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет светло-лиловую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (2,35% вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 30°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост | Цвет колоний |
|---|---|---|
Listeria monocytogenes (19118) | Хороший или обильный | Темно-бордовый |
Pseudomonas aeruginosa (27853) | Хороший или обильный | Темно-бордовый |
Yersinia enterocolitica (27729) | Хороший или обильный | Темно-бордовый |
Staphylococcus aureus (25923) | Отсутствует | – |
Ссылки:
1. Olson H.C., 1963, J. Dairy Sci., 46:362.
2. Speck M. (Ed.), 1984, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 2nd ed., American Public Health Association, Washington, D.C.
3. Tomkin R.B., 1973, Food Technol., 27:54.
4. Elliott R.P. and Michener H.D., 1965, U.S. Dept. Agr. Tech. Bull. No. 1320, p. 110, Washington, D.C.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.