Tergitol-7 Agar / Agar H / Broth Гептадецилсульфатный агар / Гептадецилсульфатный сероводородный агар / Гептадецилсульфатный бульон

М616 / М850 / М851

Эти среды рекомендуются в качестве селективных для подсчета колиформных бактерий.

Рост на гептадецилсульфатном агаре (M616):
Escherichia coli (желтые колонии),
Proteus vulgaris (большие красные колонии)
Pseudomonas aeruginosa (мелкие красные колонии)

 

Состав**:

Ингредиенты	М616 грамм/литр	М850 грамм/литр	М851 грамм/литр
Протеозопептон	5,00	5,00	5,00
Дрожжевой экстракт	3,00	3,00	3,00
Лактоза	10,00	10,00	10,00
Натрия гептадецилсульфат	0,10	0,10	0,10
Бромтимоловый синий	0,025	0,025	0,025
Железа аммонийного цитрат	–	0,50	–
Натрия тиосульфат	–	0,50	–
Агар-агар	15,00	15,00	–
Конечное значение рН (при 25°С)	6,9 ± 0,2	7,2 ± 0,2	6,9 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 33,13 г порошка М616 или 18,13 г порошка М851 или 34,13 г порошка М850 в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. При необходимости остудить среду до 45-50°С и асептично добавить 3 мл 1%-ный раствора 2,3,5-трифенилтетразолия хлорида (ТТХ, FD057).

Принцип и оценка результата:

Эта среда первоначально предложена Чепменом (1) и позже была модифицирована добавлением ТТХ. Эти селективно-дифференциальные среды используют для подсчета колиформных бактерий. Об избирательных бактерицидных свойствах натрия гептадецилсульфата (Тергитола-7) впервые сообщил Pollard (2), после чего этот ингибитор использовали в рутинных анализах воды (3) и для исследования пищевых материалов (4).

Данный агар является модификацией прописи Чепмена (1) для селективного выделения и дифференциации кишечных бактерий из мочи. Тиосульфат натрия является индикатором продукции сероводорода. Натрия гептадецилсульфат (Тергитол-7) подавляет рост грамположительных бактерий и роение протеев, способствуя росту колиформных бактерий. Бромтимоловый синий – индикатор рН. Микроорганизмы, ферментирующие лактозу, образуют желтые колонии с желтыми зонами, тогда как клебсиеллы и энтеробактеры – зеленовато-желтые колонии. Микроорганизмы, не ферментирующие лактозу, образуют голубые колонии. ТТХ восстанавливается бактериальными клетками до нерастворимого формазана, который окрашивает колонии в красный цвет.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий желтый порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю (М616 или М850).

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда окрашена в зеленый цвет, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри или пробирках формируется гель.

Кислотность среды:

При 25°С водные растворы М616 (3,31% вес/об) или М851 (1,81% вес/об) имеют рН 6,9 ± 0,2, а водный раствор М850 (3,41% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35°С на средах М616/М851.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Цвет колоний
Enterobacter aerogenes (13048)	Обильный	Желтый
Escherichia coli (25922)	Обильный	Желтый
Salmonella typhimurium (14028)	Обильный	Голубой
Shigella flexneri (12022)	Обильный	Голубой
Staphylococcus aureus (25923)	Подавляется	–

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35°С на среде М850.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Цвет колоний	H2S
Escherichia coli (25922)	Обильный	Желтый	–
Proteus mirabilis (25933)	Обильный	Голубой	+
Salmonella enteritidis (13076)	Обильный	Голубой	+
Klebsiella pneumoniae (13883)	Средний или хороший	Зеленовато-желтый	–
Enterococcus faecalis (29212)	Подавляется	–	–

Ссылки:

1. Chapman G.H., 1947, J. Bact., 53:504.
2. Pollard A.L., 1946, Science, 103:758.
3. Kulp W., Mascoli C. and Tavshanjian O., 1953, Am. J. Public Health, 43:1111.
4. Mossel D.A.A., 1962, J. Appl. Bact., 25:20.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.