Аргининовый бульон
Arginine Dihydrolase Broth | M619 |
Бульон используют для определения у микроорганизмов аргининдегидролазы.
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Пептический перевар животной ткани | 1,00 |
Натрия хлорид | 5,00 |
Калия гидрофосфат | 0,30 |
L-аргинин | 10,00 |
Бромкрезоловый пурпурный | 0,016 |
Агар-агар | 3,00 |
Конечное значение рН (при 25°С) 7,2 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 19,3 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть для полного растворения частиц. Разлить в пробирки размером 13 х 100 мм и стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить, оставив пробирки в вертикальном положении.
Принцип и оценка результата:
Аргининовый бульон используют для определения у микроорганизмов аргининдегидролазы. Этот фермент, наряду с другими микробными декарбоксилазами аминокислот, часто определяют с целью дифференциации бактерий, например энтеробактерий (1). Определение аргининдегидролазы полезно для дифференциации некоторых фенотипически близких бактерий (2). Бактерии, продуцирующие аргининдегидролазу, вызывают щелочение питательной среды продуктом декарбоксилирования аргинина. Индикатор рН бромкрезоловый пурпурный в щелочной среде приобретает лиловый цвет. Пептический перевар животной ткани является источником питательных веществ для роста бактерий, аргинин стимулирует синтез соответствующего фермента. Фосфат калия придает буферность среде, а хлорид натрия – адекватное осмотическое давление.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется полужидкая среда, соответствующая по плотности 0,3%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая среда имеет пурпурную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в пробирках формируется столбик геля.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (1,93% вес/об) имеет рН 7,2 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост | Подвижность | Аргининдегидролаза |
|---|---|---|---|
Salmonella typhi (6539) | Обильный | + | + |
Salmonella typhimurium (14028) | Обильный | + | + |
Proteus vulgaris (13315) | Обильный | + | – |
Enterobacter aerogenes (13048) | Обильный | + | – |
Klebsiella pneumoniae (13883) | Обильный | – | – |
Примечания:
в тесте на подвижность «+» – положительный результат (рост в среде за пределами укола),
«–» - отрицательный результат (рост по ходу укола);
в тесте на аргининдегидролазу «+» – положительный результат (лиловое окрашивание среды),
«–» - отрицательный результат (цвет среды неизменен).
Ссылки:
1. Moeller, 1955, Acta Path. et Micro. Scand., 34:102.
2. Gale and Epps, 1944, Biochem. J., 38:250.v
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.