Mineral Modified Glutamate Medium Base (Twin Pack) Основа синтетической среды с глютаматом модифицированной (двухкомпонентная)

M643

Эту среду (двойной концентрации) используют для подсчета колиформных бактерий в воде и стоках.

 

Определение колиформных бактерий методом бродильных проб на среде
Mineral Modified Glutamate Medium Base (M643), слева направо:
1. Shigella flexneri
2. Salmonella серовара Typhimurium
3. Escherichia coli
4. Контроль (незасеянная среда)

 

Состав**:

Ингредиенты	грамм/литр
Часть А:
Лактоза	20,00
Калия гидрохлорид	1,80
Натрия формат	0,50
L-Цистин	0,04
L-Аргинин	0,048
Тиамин	0,04
Никотиновая кислота	0,002
Пантотеновая кислота	0,002
Магния сульфат	0,002
Железа аммонийного цитрат	0,20
Кальция хлорид	0,02
Бромкрезоловый пурпурный	0,02
Часть В:
Натрия глютамат	12,70
Конечное значение рН (при 25°С) 6,7 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 22,7 г порошка части А и 12,7 г порошка части В в 1000 мл дистиллированной воды, содержащей 5 г хлорида аммония. Подогреть (при необходимости) для полного растворения частиц. Разлить в пробирки с поплавками. Стерилизовать автоклавированием при 0,7 атм (115°С) в течение 10 мин. Для приготовления среды обычной (не двойной) концентрации смешать 11,35 г порошка части А и 6,35 г порошка части В в 1000 мл дистиллированной воды, содержащей 2,5 г хлорида аммония

Принцип и оценка результата:

Эта среда используется для подсчета колиформных бактерий в воде и стоках. Первая синтетическая среда на основе глютаминовой кислоты для подсчета колиформных бактерий в воде была предложена Folpmers (1). Однако вскоре было установлено, что на среде с глюкозой к 48 ч появляется много ложноположительных результатов (2). В соответствии с модификацией Грея, в среду введен формат и лактоза (3). Такую среду можно использовать и для определения кишечной палочки в хлорированной воде; если при этом определяют небольшие количества Escherichia coli, она дает результаты лучше, чем Лаурил-триптозный бульон с лактозой.

В составе среды различные питательные вещества, включая соли, аминокислоты, витамины. Лактоза – ферментируемый субстрат, бромкрезоловый пурпурный – индикатор рН. По своим питательным качествам среда хорошо подходит для исследования воды и стоков, так как удовлетворяются все питательные потребности колиформных микроорганизмов.

Материал из положительно реагирующих пробирок пересевают на Лаурил-триптозный бульон с маннитом (М10070) и Желчный бульон с бриллиантовым зеленым (М121). Инкубируют при 44°С для определения индолообразования и идентифицируют Escherichia coli.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Часть А:

Гомогенный сыпучий порошок желтого цвета.

Часть В:

Гомогенный сыпучий порошок белого цвета.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет лиловую окраску, прозрачна, без какого-либо преципитата.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор среды (смеси 2,27%, вес/об, части А и 1,271%, вес/об, части В с добавлением 0,5% хлорида аммония) имеет рН 6,7 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 37°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост	Кислота	Газ
Escherichia coli (25922)	Обильный	+	+
Enterobacter aerogenes (13048)	Обильный	+	–
Salmonella typhi (6539)	Обильный	–	–
Shigella flexneri (12022)	Обильный	–	–
Staphylococcus aureus (25923)	Подавляется	–	–
Enterococcus faecalis (29212)	Подавляется	–	–

Ссылки:

1. Folpmers T., 1948, Ant. V. Leeuwenhoek, J. Microbiol. Serol., 14:58.
2. Public Health Laboratory Service, Water Committee, 1958, J. Hyg. Camb., 56:377.
3. Gray R.D., 1959, J. Hyg. Camb., 57:249.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.