Агар Сабуро с хлорамфениколом и циклогексимидом
Sabouraud Cycloheximide Chloramphenicol Agar / Sabouraud Dextrose Agar, Modified | M664 / M286 |
Агар Сабуро с хлорамфениколом и циклогексимидом используют для селективного выделения и культивирования грибов.
Состав**:
| Ингредиенты | М664 грамм/литр | М286 грамм/литр |
|---|---|---|
Пептон специальный | – | 10,00 |
Пептический перевар животной ткани | 10,00 | – |
Глюкоза | 20,00 | 20,00 |
Циклогексимид | 0,50 | – |
Хлорамфеникол | 0,04 | – |
Агар-агар | 15,00 | 17,00 |
Конечное значение рН (при 25°С) | 6,8 ± 0,2 | 6,9 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 45,54 г порошка М664 в 1000 мл дистиллированной воды или 23,5 г порошка М286 в 500 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. К среде М286 асептично добавить растворенное в воде содержимое 1 пузырька с добавкой FD169. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.
Предупреждение: Циклогексимид очень токсичен, поэтому следует избегать вдыхания порошка и попадания его на кожу.
Принцип и оценка результата:
Агар Сабуро с глюкозой первоначально предложен Sabouraud (1) и затем модифицирован Emmons (2) путем уменьшения количества глюкозы и приведения рН к более нейтральному значению. Данная среде одобрена специалистами АРНА (3).
для культивирования грибов, в частности тех, которые связаны с инфекциями кожи. Агар Сабуро с глюкозой рекомендован американской Фармакопеей для теста на присутствие микроорганизмов (3). Для выделения патогенных грибов из материалов, обильно контаминированных грибами или бактериями, в эту среду часто добавляют антибиотики, например, хлорамфеникол (4).
Пептический перевар животной ткани и специальный пептон служат источником необходимых питательных веществ для роста. Глюкоза является источником энергии. Среда имеет повышенную селективность. Хлорамфеникол (4) и циклогексимид (5) подавляют рост не только широкого спектра грамположительных и грамотрицательных бактерий, но и некоторых сапрофитных и патогенных грибов. На данной среде подавляется рост Cryptococus neoformans, Aspergillus spp., Nocardia spp., некоторых видов Candida, но хорошо растут дерматофиты.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю (М664) или 1,7%-ному агаровому гелю (М286).
Цвет и прозрачность готовой среды:
Основа среды имеет желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, когда в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор М664 (4,554% вес/об) имеет рН 6,8 ± 0,2, а раствор М286 (4,7% вес/об) имеет рН 6,9 ± 0,2 .
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 2-3 недели при 25-30°С.
| Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост |
|---|---|
Trichophyton mentagrophytes (9533) | Обильный |
Trichophyton rubrum (28191) | Обильный |
Candida albicans (10231) | Хороший или слабый |
Aspergillus niger (16404) | Слабый или отсутствует |
Saccharomyces cerevisiae (9763) | Слабый или отсутствует |
Escherichia coli (25922) | Подавляется |
Условия и сроки хранения:
Порошок М286 хранить при температуре ниже +25°С, порошок М664 – при температуре ниже +8°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.