Среда Эдвардса для стрептококков
Edwards Medium Modified | М748 |
Этот агар в качестве селективной дифференциальной среды используют для быстрого выделения стрептококков, вызывающих мастит у крупного рогатого скота.
Рост колоний Enterococcus faecalis на модифицированной среде Эдвардса (M748)
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Пептический перевар животной ткани | 10,00 |
Мясной экстракт | 10,00 |
Эскулин | 1,00 |
Натрия хлорид | 5,00 |
Таллия сульфат | 0,33 |
Кристаллический фиолетовый | 0,0013 |
Агар-агар | 15,00 |
Конечное значение рН (при 25°С) 7,4 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Тщательно размешать 41,33 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 0,7 атм (115°С) в течение 20 мин. Остудить до 50°С и асептично добавить (до 5-7% об/об) стерильной дефибринированной бараньей или говяжьей крови. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.
Принцип и оценка результата:
Edwards (1) применил кровяной агар с эскулином и кристаллвиолетом для культуральной диагностики коровьего мастита, а McKenzie (2) с той же целью использовал среду, содержащую ацетат таллия. Представленная пропись является модификацией среды Эдвардса (3). Селективные свойства среду обусловлены присутствием кристаллвиолета и сульфата таллия. Стрептококки – возбудители коровьего мастита – относят к a-, b- гемолитическим или негемолитическим. Эскулин помогает дифференцировать энтерококки (дают положительную реакцию с эскулином) и Streptococcus agalactiae (эскулинотрицательны).
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Основа среды имеет янтарную окраску прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель. После добавления стерильной дефибринированной бараньей или говяжьей крови (до 5-7% об/об) среда становится непрозрачной, вишнево-красного цвета.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (4,13% вес/об) имеет рН 7,4 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при 35°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост | Цвет колоний |
|---|---|---|
Streptococcus agalactiae (13613) | Обильный | Бесцветные с гемолизом |
Enterococcus faecalis (29212) | Обильный | Черные |
Staphylococcus aureus (25923) | Подавляется | – |
Ссылки:
1. Edwards S.J., 1933, J. Comp. Path. Therap., 46:211.
2. McKenzie D.A., 1941, Vet. Rec., 53:473.
3. Hauge S.T. and Kohler - Ellingsen J., 1953, Nord. Vet. Med., 5:539.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.