Основа кровяного агара для эризипелотриксов
Sodium Azide Crystal Violet Blood Agar Base | M767 |
Этот агар используют для селективного выделения и культивирования Erysipelothrix rhusiopathiae.
Состав**:
| Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Настой говяжьего сердца | 500,00 |
Гидролизат казеина | 20,00 |
Натрия хлорид | 5,00 |
Глюкоза | 0,20 |
Натрия азид | 0,30 |
Кристаллический фиолетовый | 0,002 |
Агар-агар | 15,00 |
Конечное значение рН (при 25°С) 7,0 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 50,5 г порошка в 950 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С и асептично добавить (до 5% об/об) стерильной дефибринированной крови. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.
Предупреждение: Азид натрия имеет тенденцию к образованию взрывчатых соединений с металлами, поэтому рекомендуется использовать много воды для удаления остатков среды.
Принцип и оценка результата:
Этот агар разработан Packer (1) для селективного культивирования Erysipelothrix rhusiopathiae. Его можно также использовать для выделения стрептококков, в том числе пневмококков.
Настой говяжьего сердца и гидролизат казеина служат источником азотистых питательных веществ, микроэлементов и других веществ, необходимых для роста микроорганизмов. Глюкоза является источником ферментируемых углеводов, но Erysipelothrix rhusiopathiae слабо ферментрируют ее и газ не образуют. Натрия азид и кристаллический фиолетовый подавляют рост большинства грамотрицательных и грамположительных бактерий, соответственно (2). Кровь служит источником дополнительных факторов роста и позволяет выявить гемолиз. Хлорид натрия обеспечивает оптимальное осмотическое давление.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Основа среды имеет лиловый цвет, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель. После добавления крови (до 5%, об/об) среда становится красновато-лилового цвета, непрозрачна, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (5,05% вес/об) имеет рН 7,0 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35-37°С в атмосфере, содержащей 5-10% углекислого газа, или через 48 ч при 35°С в анаэробной атмосфере.
| Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост |
|---|---|
Erysipelothrix rhusiopathiae (19414) | Хороший или обильный |
Streptococcus pneumoniae (6303) | Хороший или обильный |
Escherichia coli (25922) | Подавляется |
Proteus mirabilis (25933) | Подавляется |
Staphylococcus aureus (25923) | Подавляется |
Ссылки:
1. Packer R.A., 1943, J. Bact., 46 : 343.
2. MacFaddin J., 1985, Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria, Vol. I, Williams and Wilkins, Baltimore.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.