Основа желточного агара (для анаэробов)
Egg Yolk Agar Base | M808 |
Этот агар используется для выделения и идентификации клостридий и других анаэробов.
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Протеозопептон | 40,00 |
Натрия гидрофосфат | 5,00 |
Калия дигидрофосфат | 1,00 |
Натрия хлорид | 2,00 |
Магния сульфат | 0,10 |
Глюкоза | 2,00 |
Гемин | 0,005 |
Агар-агар | 25,00 |
Конечное значение рН (при 25°С) 7,6 ± 0,2
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 75,0 г порошка в 900 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Разлить по 90 мл и стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50-55 °С и добавить по 10 мл стерильной эмульсии яичного желтка (FD045) на каждые 90 мл среды. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.
Принцип и оценка результата:
Лецитиназоположительные микроорганизмы воздействуют на лецитин, содержащийся в желтке яйца, что приводит к появлению зоны нерастворимого преципитата вокруг колоний таких микроорганизмов (1). Колонии липолитических микробов окружены радужной зоной, а протеолитические – зоной просветления (2).
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 2,5% агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Готовая основа среды имеет янтарную окраску и слегка опалесцирует. После добавления эмульсии желтка (FD045) среда становится непрозрачной и желтой, если в чашках Петри формируется пластинка геля.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор (7,5% вес/об) имеет рН 7,6 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35-37°С .
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост | Лецитиназа | Протеаза | Липаза |
|---|---|---|---|---|
Bacteroides fragilis (25285) | Хороший | – | – | – |
Clostridium botulinum (25763) | Хороший | – | + | – |
Clostridium butyricum (9690) | Хороший | – | – | – |
Clostridium perfringens (12919) | Хороший | + | + | – |
Clostridium sporogenes (11437) | Хороший | – | + | + |
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +30°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.