.gif){kind=spacer}
Основа агара для Clostridium perfringens
Perfringens Agar Base | M837 / M837I |
Этот агар с селективными и обогащающими добавками используют для предварительной идентификации и подсчета Clostridium perfringens в пищевых продуктах.
Состав**:
Ингредиенты | М837 грамм/литр | М837I грамм/литр |
|---|---|---|
Триптоза | 15,00 | 15,00 |
Папаиновый перевар соевой муки | 5,00 | 5,00 |
Мясной экстракт | 5,00 | – |
Дрожжевой экстракт | 5,00 | 5,00 |
Натрия гидросульфит | 1,00 | 1,00 |
Железа аммонийного цитрат | 1,00 | 1,00 |
Агар-агар | 15,00 | 15,00 |
Конечное значение рН (при 25°С) 7,6 ± 0,2 | | |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 23,5 г порошка М837 в 475 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С, асептично добавить 25 мл эмульсии яичного желтка (FD045) и растворенное в воде содержимое 1 флакончика с добавкой FD014. Тщательно перемешать и разлить среду в стерильные чашки Петри.
Размешать 21,0 г порошка М837I в 500 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 50°С, асептично добавить растворенное в воде содержимое 1 флакончика с добавкой FD013/FD014. Тщательно перемешать и разлить среду в стерильные чашки Петри.
Принцип и оценка результата:
Эта среда первоначально разработана Harmon и соавт. (1). В дальнейшей модификации (2) он рекомендован специалистами АРНА (3) и международным комитетом (4) для подсчета Clostridium perfringens в пищевых продуктах. Показано, что эта среда наиболее полезна для количественных посевов для выделения Clostridium perfringens, так как на ней подавляется рост почти всех других факультативных анаэробов. Этот агар в чашечном методе подсчета спор Clostridium perfringens превосходит метод определения НВЧ при повышенной температуре (46°С)(5).
Среда содержит триптозу, папаиновый перевар соевой муки, мясной и дрожжевой экстракты, обеспечивающие присутствие азотистых веществ, углерода, серы, витаминов группы В и микроэлементов для роста клостридий. Гидросульфит натрия и цитрат аммонийного железа образуют индикаторную систему на восстановление сульфита Clostridium perfringens, которые образуют черные колонии.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Основа среды имеет янтарную окраску, слегка опалесцирует. После добавления FD014 и яичного желтка становится непрозрачной, когда в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водные растворы М837 (4,7% вес/об) и М837I (4,2% вес/об) имеют рН 7,6 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35°С в анаэробных условиях.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост | Восстановление сульфита |
|---|---|---|
Clostridium perfringens (12924) | Обильный | + |
Clostridium sordelii (9714) | Подавляется | – |
Ссылки:
1. Harmon S.M., Kauttar D.A. and Peiler J.T., 1971, Appl. Microbiol., 22:688.
2. Hauschild A.H.W. and Hilsheimer R., 1974, Appl. Microbiol., 27 : 78.
3. Vanderzant C. and Splittstoesser D. (Eds.), 1992, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 3rd ed., APHA, Washington, D.C.
4. International Organization for Standardization (ISO), 1985, Draft ISO/DIS 7937.
5. Harmon S.M. and Kautter D.A., 1987, J. Asso. Off. Anal. Chem., 70 : 994.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.