.gif){kind=spacer}
Основа агара / бульона М17 с лактозой / глицерофосфатом
M17 Agar Base / without Lactose / with Glycerophosphate / Broth | M929 / M1019 / М1063 / М1029 |
Среды М17 используют для культивирования молочных стрептококков и изучения «молочных» бактериофагов методом бляшкообразования.
Состав**:
Ингредиенты | М929 Грамм/литр | М1019 грамм/литр | М1063 грамм/литр | М1029 грамм/литр |
|---|---|---|---|---|
Гидролизат казеина | – | 5,00 | – | 2,50 |
Пептический перевар животной ткани | 5,00 | – | – | 2,50 |
Папаиновый перевар соевой муки | 5,00 | 5,00 | 5,00 | 5,00 |
Биопептон | – | – | 5,00 | – |
Дрожжевой экстракт | 2,50 | 2,50 | 2,50 | 2,50 |
Мясной экстракт | – | 5,00 | – | – |
Говяжий экстракт | 5,00 | – | 5,00 | 5,00 |
Кислота аскорбиновая | 0,50 | 0,50 | 0,50 | 0,50 |
Магния сульфат | 0,25 | 0,25 | 0,25 | 0,25 |
Лактоза | 5,00 | – | 5,00 | 5,00 |
Динатрий-b-глицерофосфат | – | 19,00 | 19,00 | 19,00 |
Агар-агар | 10,00 | 11,00 | 10,00 | – |
Конечное значение рН (при 25°С) | 7,1 ± 0,2 | 6,9 ± 0,2 | 7,1 ± 0,2 | 7,1 ± 0,2 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 33,25 г порошка М929 или 52,25 г порошка М1063 или 42,25 г порошка М1029 в 1000 мл дистиллированной воды. Добавить 19,0 г динатрий-b-глицерофосфата в среду М929. Размешать 48,25 г порошка М1019 в 950 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 45°С и асептично нанести 50 мл стерилизованного отдельно 10%-ного (вес/об) раствора лактозы в среду М1019. Тщательно перемешать и разлить в соответствующую посуду.
Принцип и оценка результата:
Эти среды предложены Terzaghi и Sandine (1) для культивирования и подсчета молочных стрептококков, а также их бактериофагов. На них можно изучать лизогению и морфологические особенности фагов. Бульон М17 является модификацией бульона М16 (2).
Молочнокислые стрептококки – прихотливые микроорганизмы, требующие для оптимального роста сложные среды (3, 4). Динатрий-b-глицерофосфат обеспечивает поддержание рН выше 5,7, что важно, так как при более низких значениях клетки повреждаются и выделяемость таких стрептококков снижается. Глицерофосфат не дает преципитата с ионами кальция, что необходимо для исследования бактериофагов молочнокислых стрептококков методом бляшкообразования.
Гидролизат казеина, пептический перевар животной ткани, папаиновый перевар соевой муки, биопептон, дрожжевой, мясной и говяжий экстракты служат источником углерода, азота, минеральных веществ, витаминов В и других важных факторов роста данных бактерий. Лактоза служит ферментируемым углеводом. Аскорбиновая кислота стимулирует рост молочнокислых стрептококков. Сульфат магния обеспечивает присутствие в среде важнейших ионов.
Shankar и Davies (5) сообщили о выделении Streptococcus thermophilus из йогурта. Динатрий-b-глицерофосфат подавляет рост Lactobacillus bulgaricus. Агар М17 рекомендован международными организациями (6, 7) для селективного подсчета Streptococcus thermophilus в йогурте. Он также подходит для культивирования и поддержания «стартовых культур» (заквасок) на производстве сыра и йогурта. На среде можно определять не ферментирующие лактозу мутанты стрептококков.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий светло-желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,0%-ному (М929, М1063) или 1,1%-ному (М1019) агаровому гелю .
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет светло-желтую окраску, слегка опалесцирует, если в пробирках или чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водные растворы М929 (3,33% вес/об), М1063 (5,23% вес/об) или М1029 (4,23% вес/об) имеют рН 7,1 ± 0,2, раствор М1019 (4,83% вес/об) имеет рН 6,9 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при 35°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост |
|---|---|
Lactobacillus leichmannii (4797) | Хороший или обильный |
Lactobacillus plantarum (8014) | Хороший или обильный |
Enterococcus faecalis (29212) | Хороший или обильный |
Streptococcus thermophilus (14486) | Хороший или обильный |
Lactobacillus bulgaricus (11842) | Слабый или отсутствует |
Ссылки:
1. Terzaghi B.E. and Sandine W.E., 1975, Appl. Microbiol., 29:807.
2. Lawrie and Pearee, 1971, J. Dairy Sci. Technol., 6:166.
3. Anderson A.W. and Elliker P.R., 1953, J. Dairy Sci., 36:161.
4. Reiter B. and Oran J.D., 1962, J. Dairy Res., 29:63.
5. Shankar P.A. and Davies F.L., 1977, Soc. Dairy Technol., 30:28.
6. International Dairy Federation, 1981, Joint IDF/ISO/AOAC Group E44.
7. International Organization for Standardization, 1985, ISO/DIS:7889.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.