Potassium Cyanide Broth Base without KCN Основа цианидного бульона (без KCN)

M936

Эту среду с добавлением цианида калия используют для дифференциации энтеробактерий по толерантности к цианиду.

Состав**:

Ингредиенты	грамм/литр
Протеозопептон	3,00
Натрия гидрофосфат	5,64
Калия дигидрофосфат	0,225
Натрия хлорид	5,00
Конечное значение рН (при 25°С) 7,6 ± 0,2

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 13,9 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть (при необходимости) для полного растворения частиц. Разлить по 100 мл во флаконы. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до комнатной температуры и асептично добавить по 1,5 мл 0,5%-ного стерильного раствора цианида калия на 100 мл основы. Тщательно перемешать и разлить по 1 мл в пробирки.

Предупреждение: Цианид калия очень ядовит, поэтому при обращении с ним необходима крайняя осторожность. Ни в коем случае не пипетировать раствор цианида ртом!

Принцип и оценка результата:

Эту среду предложил Мюллер (1), после чего она подвергалась модификациям (2, 3) для дифференциации энтеробактерий.

Среда содержит протеозопептон, обеспечивающий присутствие азотистых питательных веществ, серы и микроэлементов для роста бактерий. Фосфаты обеспечивают буферные свойства среды, а хлорид натрия – оптимальное осмотическое давление. Цианид калия подавляет рост многих бактерий, включая сальмонеллы, шигеллы и эшерихии, тогда, как клебсиеллы, цитробактеры и протеи хорошо растут в его присутствии. Цианидная среда остается стабильной обычно в течение 4 недель при 4°С (3). При более высоких температурах цианид может разрушаться или испаряться (4). Перед уничтожением в автоклаве цианид калия следует разрушить добавлением кристаллов сульфата железа и 0,1 мл 40%-ного раствора гидроксида калия (5).

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий порошок желтого цвета.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет светло-янтарную окраску, прозрачна, без какого-либо преципитата.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (1,39% вес/об) имеет рН 7,6 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при 35°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)	Рост
Citrobacter freundii (8090)	Обильный
Klebsiella pneumoniae (13883)	Обильный
Proteus vulgaris (13315)	Обильный
Pseudomonas aeruginosa (27853)	Обильный
Escherichia coli (25922)	Подавляется
Salmonella enteritidis (13076)	Подавляется
Shigella flexneri (12022)	Подавляется

Ссылки:

1. Moeller V., 1954, Acta. Pathol. Microbiol. Scand., 34:115.
2. Edwards P.R. and Ewing W.H., 1955, Minneapolis, Burgess Publishing Co.
3. Edwards P.R. and Fife M.A., 1956, Appl.Microbiol., 4:46.
4. Munson T.E., 1974, Appl.Microbiol., 27:262.
5. Cowan S.T. and Steel K.J., 1966, Manual for the Identification of Medical Bacteria, Cambridge, Cambridge University Press.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.