Желчно-эскулиновый агар
Bile Esculin Agar / Agar Base | М972 / M340 |
Эта дифференциальная среда рекомендуется для выделения и предварительной идентификации энтерококков в пищевых продуктах и фармпрепаратах.
Bile Esculin Agar (M972) Рост Enterococcus faecalis
Состав**:
Ингредиенты | М972 грамм/литр | М340 грамм/литр |
|---|---|---|
Пептический перевар животной ткани | 5,00 | 5,00 |
Мясной экстракт | 3,00 | 3,00 |
Oxgall | 40,00 | 40,00 |
Эскулин | 1,00 | – |
Железа цитрат | 0,50 | 0,50 |
Агар-агар | 15,00 | 15,00 |
Конечное значение рН (при 25°С) 6,6 ± 0,2 |
**Составвыверенидоведендосоответствиянеобходимымпараметрам
Приготовление:
Размешать 64,5 г порошка М972 или 63,5 г порошка М340 в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. Добавить 1 г эскулина (FD050) в М340. Перемешать и разлить в пробирки или флаконы. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Пробирки оставить в наклонном положении для формирования скошенного агара.
Принцип и оценка результата:
Этот агар разработан Swan (1), как среда для выделения и идентификации стрептококков группы Д из пищевых продуктов. Она содержит 4% Oxgall, подавляющего рост грамположительных бактерий, не относимых к стрептококкам группы Д и энтерококкам. Последние гидролизуют эскулин на глюкозу и эскулетин, который, реагируя с цитратом железа, образует коричневато-черный преципитат в среде (2). Первоначально желчно-эскулиновый тест использовали для идентификации энтерококков, но затем было показано, что так реагируют стрептококки группы Д (3), поэтому для правильной идентификации энтерококков рекомендуется проведение дополнительных тестов (например, тест на галотолерантность) (4). По способности к гидролизу эскулина на данной среде также можно дифференцировать другие микроорганизмы, например, энтеробактерии (5).
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий коричневато-желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет желтую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует с голубым оттенком, если в чашках Петри формируется гель.
Кислотность среды:
При 25°С водный раствор М972 (6,5% вес/об) или раствор М340 (6,35% вес/об) имеют рН 6,6 ± 0,2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 40-48 ч при 35°С в анаэробных условиях.
Штамм микроорганизмов (АТСС) | Рост | Гидролиз эскулина |
|---|---|---|
Enterococcus faecalis (29212) | Обильный | + |
Streptococcus pyogenes (19615) | Обильный | – |
Proteus mirabilis (25933) | Обильный | – |
Ссылки:
1. Swan A., 1954, J. Clin. Pathol., 7:160.
2. MacFaddin J.F., 1985, Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria, Vol. I, Williams and Wilkins, Baltimore.
3. Facklam R., 1972, Appl. Microbiol., 23:1131.
4. Facklam R., 1973, Appl. Microbiol., 26:138.
5. Edberg S.C., Pittman S., and Singer J.M., 1977, J. Clin. Microbiol., 6:111.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.