Дезоксихолат-цитратный агар
Deoxycholate Citrate Agar | MM065 |
Этот агар в соответствии с рекомендациями индийской Фармакопеи используют для селективного выделения и идентификации сальмонелл.
Состав**:
Ингредиенты | грамм/литр |
|---|---|
Пептический перевар животной ткани | 5,00 |
Говяжий экстракт | 5,00 |
Лактоза | 10,00 |
Натрия цитрат | 8,50 |
Натрия тиосульфат | 5,40 |
Железа цитрат | 1,00 |
Натрия дезоксихолат | 5,00 |
Нейтральный красный | 0,02 |
Агар-агар | 12,00 |
** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 52 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть до кипения для полного растворения частиц. НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ И НЕ ПЕРЕГРЕВАТЬ СРЕДУ. Остудить до 45-50 °С, тщательно перемешать и разлить среду в стерильные чашки Петри. Перед использованием поверхность среду подсушить.
Принцип и оценка результата:
Этот агар рекомендован индийской Фармакопеей (1) в качестве селективной среды для выделения и идентификации сальмонелл.
Эта среда основана на прописи Leifson (2), который предложил дифференциальный агар с читыми веществами, цитратами и дезоксихолатом в качестве ингибиторов роста. Эту пропись модифицировали многие авторы. В настоящей прописи среда имеет повышенные концентрации ингибиторов и предназначена для санитарной микробиологии пищевых продуктов (3).
Дезоксихолат натрия и цитраты подавляют рост грамположительных микроорганизмов. Лактоза помогает дифференцировать кишечные бактерии. Лактозоотрицательные бактерии формируют на этой среде бесцветные колонии, а ферментирующие данный углевод бактерии – красные колонии. Восстановление цитрата аммонийного железа в присутствии сероводорода, образованного микроорганизмами, приводит к образованию сульфида железа и, соответственно, почернению центра колоний. Тиосульфат натрия стимулирует продукцию сероводорода.
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий розовато-желтый порошок.
Плотность готовой среды:
Образуется среда, соответствующая по плотности 1,2 %-му агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
Среда имеет красно-оранжевую окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в чашках Петри формируется гель.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-24 ч при 35°С.
Штаммы микроорганизмов (АТСС) | Рост | Цвет колоний | Сероводород |
|---|---|---|---|
Escherichia coli (25922) | Обильный | Розово-красные с желчным преципитатом | – |
Salmonella серовара Typhimurium (14028) | Обильный | Бесцветные | + |
Salmonella серовара Enteritidis (13076) | Обильный | Бесцветные | + |
Shigella flexneri (12022) | Обильный | Бесцветные | – |
Enterococcus faecalis (29212) | Подавляется | – | – |
Ссылки:
1. Indian Pharmacopoeia, 1996, Volume II, Government of India, Ministry of Health and Family Welfare, Publications and Information Directorate (CSIR), New Delhi.
2. Leifson, 1935, J. Pathol. Bacteriol., 40:581.
3. Speck M. (Ed.), 1984, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 2nd ed., APHA, Washington, D.C.
Условия и сроки хранения:
Порошок хранить при температуре ниже +30 °С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.