Агар Клиглера (модифицированный)

Эти среды рекомендуют для дифференциации грамотрицательных бактерий кишечного происхождения по их способности ферментировать глюкозу и лактозу, а также продуцировать сероводород.

Состав**:

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 57,7 г порошка М078I или 57,3 г порошка М078А в 1000 мл дистиллированной воды. Прокипятить для полного растворения частиц. Разлить в пробирки. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить пробирки в таком положении, чтобы получить скошенную часть и столбик высотой 2,5 см. Наилучшие результаты получают на свежеприготовленной среде.

Принцип и оценка результата:

Эти среды являются модификациями агар Клиглера (1). Международным комитетом (ISO) среда М078I рекомендована для предварительной идентификации Yersinia enterocolitica (2), а среда М078А – псевдомонад (3).

Гидролизат казеина и мясные пептоны служат источником важнейших питательных веществ, а дрожжевой экстракт – витаминов группы В. Лактоза и глюкоза – ферментируемые субстраты, продукты разложения которых могут изменять цвет индикатора рН фенолового красного.

Тиосульфат натрия и сульфат железа усиливают образование сероводорода, который выявляют по развитию почернения всего столбика или формированию черного кольца у верхушки столбика. Образование газа определяют по появлению пузырьков и разрывов среды. О ферментации глюкозы свидетельствует желтый столбик, лактозы – желтый скос. На агар Клиглера для предварительной идентификации засевают также чистые культуры с чашечных сред, например, Агара МакКонки (М082), Висмут-сульфитного агара (М027) или Дезоксихолат-цитратного агара (М065), Агара Сальмонелла-Шигелла (М108) или др. Для посева в глубину среды рекомендуется использовать прямую проволоку, чтобы не вызвать разрывов среды при посеве петлей.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий светло-красный порошок.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5%-ному агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Готовая среда имеет красную окраску, прозрачна или слегка опалесцирует, если в пробирках формируется скошенный столбик геля.

Кислотность среды:

При 25°С водные растворы М078I (5,77% вес/об) и М078А (5,73% вес/об) имеют рН 7,4 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при 37°С.

Примечание:
К - образование кислоты (желтый цвет);
Щ - образование щелочи (красный цвет);
"+" - положительная реакция (почернение);
V - вариабельная реакция.

Ссылки:

1. Kligler I.J., 1918, J. Exp. Med., 28:319.
2. International Organization For Standardization (ISO), 1994, Draft ISO/DIS 10273.
3. International Organization For Standardization (ISO), 1995, Draft ISO/DIS 13720.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.