Малонатный бульон


Malonate Broth
Малонатный бульон
M382
Malonate Broth, Ewing Modified
Малонатный бульон по Юингу
M779

 

Малонатный бульон рекомендуют для дифференциации эшерихий и энтеробактеров. 

 

Рост энтеробактерий на малонатном бульоне (M382), слева направо: 
1.Salmonella серовара Typhimurium
2.Escherichia coli
3.Klebsiella penumoniae
4.Enterobacter aerogenes
5. Контроль (незасеянная среда)

 

  

Состав**:

Ингредиенты
М382
грамм/литр
М779
грамм/литр
Дрожжевой экстракт, паста
–
1,00
Глюкоза
–
0,25
Аммония сульфат
2,00
2,00
Калия гидрофосфат
0,60
0,60
Калия дигидрофосфат
0,40
0,40
Натрия хлорид
2,00
2,00
Натрия малонат
3,00
3,00
Бромтимоловый синий
0,025
0,025
Конечное значение рН (при 25°С) 6,7 ± 0,2
 
 

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 8,0 г порошка М382 или 9,28 г порошка М779 в 1000 мл дистиллированной воды. Разлить в пробирки. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Избегать внесения в среду дополнительных источников углерода или азота.

Принцип и оценка результата:

Эту среду предложил Лейфсон (1), а в дальнейшем модифицировал Юинг (2), добавив дрожжевой экстракт и глюкозу, для дифференциации колиформных и других кишечных бактерий.

Микроорганизмы, которые одновременно утилизируют малонат натрия в качестве источника углерода и сульфат аммония в качестве источника азота, защелачивают среду ввиду образования гидроокиси натрия (3), что сопровождается изменением цвета индикатора бромтимолового синего с зеленого на синий. Добавление дрожжевого экстракта и небольшого количества глюкозы (как источников витаминов и углерода, соответственно) стимулирует рост тех микроорганизмов, которые не утилизируют малонат или соль аммония. Фосфаты, играя роль буфера, препятствуют щелочению среды. Некоторые малонатотрицательные культуры образуют кислоту из глюкозы и вызывают, соответственно, пожелтение среды.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий порошок светло-зеленого цвета.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет сине-зеленую окраску, прозрачна, без какого-либо преципитата.

Кислотность среды:

При 25°С водные растворы М382 (0,8% вес/об) или М779 (0,928% вес/об) имеют рН 6,7 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 18-48 ч при 35-37°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост на М382
Рост на М779
Малонат (утилизация)
Enterobacter aerogenes (13048)
Обильный
Обильный
+
Klebsiella pneumoniae (13883)
Обильный
Обильный
+
Salmonella arizona (13314)
Обильный
Обильный
+
Salmonella typhimurium (14028)
Средний
или хороший
Обильный
–
Escherichia coli (25922)
Средний
или слабый
Обильный
–

Ссылки:

1. Leifson, 1933, J. Bact., 25:329.
2. Ewing W., Davis B. and Reavis R., 1957, Public Hlth. Lab., 15:153.
3. MacFaddin J., 1985, Media for Isolation-Cultivation-Identification-Maintenance of Medical Bacteria, Vol. I, Williams and Wilkins, Baltimore

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.