Основа цианидного бульона (без KCN)

Эту среду с добавлением цианида калия используют для дифференциации энтеробактерий по толерантности к цианиду.

Состав**:

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 13,9 г порошка в 1000 мл дистиллированной воды. Подогреть (при необходимости) для полного растворения частиц. Разлить по 100 мл во флаконы. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до комнатной температуры и асептично добавить по 1,5 мл 0,5%-ного стерильного раствора цианида калия на 100 мл основы. Тщательно перемешать и разлить по 1 мл в пробирки.

Предупреждение: Цианид калия очень ядовит, поэтому при обращении с ним необходима крайняя осторожность. Ни в коем случае не пипетировать раствор цианида ртом!

Принцип и оценка результата:

Эту среду предложил Мюллер (1), после чего она подвергалась модификациям (2, 3) для дифференциации энтеробактерий.

Среда содержит протеозопептон, обеспечивающий присутствие азотистых питательных веществ, серы и микроэлементов для роста бактерий. Фосфаты обеспечивают буферные свойства среды, а хлорид натрия – оптимальное осмотическое давление. Цианид калия подавляет рост многих бактерий, включая сальмонеллы, шигеллы и эшерихии, тогда, как клебсиеллы, цитробактеры и протеи хорошо растут в его присутствии. Цианидная среда остается стабильной обычно в течение 4 недель при 4°С (3). При более высоких температурах цианид может разрушаться или испаряться (4). Перед уничтожением в автоклаве цианид калия следует разрушить добавлением кристаллов сульфата железа и 0,1 мл 40%-ного раствора гидроксида калия (5).

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий порошок желтого цвета.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Среда имеет светло-янтарную окраску, прозрачна, без какого-либо преципитата.

Кислотность среды:

При 25°С водный раствор (1,39% вес/об) имеет рН 7,6 ± 0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 24-48 ч при 35°С.

Ссылки:

1. Moeller V., 1954, Acta. Pathol. Microbiol. Scand., 34:115.
2. Edwards P.R. and Ewing W.H., 1955, Minneapolis, Burgess Publishing Co.
3. Edwards P.R. and Fife M.A., 1956, Appl.Microbiol., 4:46.
4. Munson T.E., 1974, Appl.Microbiol., 27:262.
5. Cowan S.T. and Steel K.J., 1966, Manual for the Identification of Medical Bacteria, Cambridge, Cambridge University Press.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже +25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре +2…8°С.