|
|
Всего посетителей: 3847826
|
|
|
Готовые питательные среды во флаконах для выделения гемокультурСпектр продукции ХайСейф и ХайКомбиДва шага в одной процедуре, включающей инокуляцию материала и одновременное выделение изолированных колоний на поверхности плотной фазы.
HiSafe Blood Culturing System & HiCombi Dual Performance Medium Система для выделения гемокультур HiSafe и HiCombiОдним из важнейших материалов, поступающих для исследования в микробиологическую лабораторию, является кровь. Известно, что в норме кровь стерильна, поэтому выделение гемокультуры имеет принципиальное значение для диагностики, в частности, таких состояний, как эндокардит, тифо-паратифозные заболевания и сальмонеллезы, пневмония, осложненный нагноением тромбофлебит, инфекции, связанные с пластикой сосудов и др. (1). Ввиду того, что концентрации микроорганизмов в крови при бактериемиях, как правило, невысоки, для посева необходимо брать достаточно большое количество крови. Естественная бактерицидная/бактериостатическая активность крови, наряду с предшествующей антибиотикотерапией, могут быть причиной отрицательного или несвоевременно полученного положительного результата исследования на гемокультуру (2). Соответственно, для инактивации бактерицидных свойств крови и обеспечения роста бактерий в качестве нетоксичного антикоагулянта можно применять такое вещество, как SPS (натрия полианетолсульфонат) (3, 4, 5). SPS подавляет активность стрептомицина (6), полимиксина В, канамицина и гентамицина. Полезность SPS для выделения гемокультур первыми показали Van Haebler и Miles. Система для выделения гемокультур HiSafe предназначена для быстрого, эффективного и простого выделения гемокультур и их предварительной идентификации. Все питательные среды, входящие в систему ХайСейф (смотри ниже), специально разрабатывались для выращивания разнообразных клинически значимых микроорганизмов, как неприхотливых, так и прихотливых видов. МетодикаКровь у больного берут (предпочтительно до назначения антимикробной терапии) стерильным инструментом и асептично переносят во флакон системы HiSafe, содержащий соответствующую питательную среду (выбор среды зависит от свойств предполагаемого возбудителя). Засеянные флаконы инкубируют в термостате и отмечают появление мутности, изменение цвета среды, гемолиза и/или газообразования. Взятие материала
Ход исследования1. Подписывают флакон со средой для гемокультуры Учет результатовПризнаки роста появляются обычно через 48 ч. Для подтверждения отрицательного результата флаконы продолжают инкубировать в течение 7 дней. Для идентификации выделенных гемокультур требуется посев на соответствующие дифференциальные среды. Примечание: схемы идентификации выделенных гемокультур можно найти в соответствующих Руководствах (7 и др.). Возможные причины ложного результата На выделение гемокультуры оказывают влияние разные факторы:
Важные указания: используют только для диагностики in vitro. Не использовать флаконы с трещинами или другими дефектами, а также с признаками контаминации питательной среды. Перед выбрасыванием все флаконы необходимо обеззараживать автоклавированием при 1 атм (121° С) в течение 15 мин. Перед автоклавированием отвинчивают крышку флакона и приоткрывают его резиновую пробку. Спектр продукции HiCombiДва шага в одной процедуре, включающей инокуляцию материала и одновременное выделение изолированных колоний на поверхности плотной фазы. ДВУХФАЗНЫЕ СИСТЕМЫ ДЛЯ АЭРОБОВ И ФАКУЛЬТАТИВНЫХ АНАЭРОБОВ (универсальные)Представляет собой флакон (стеклянный или поликарбонатный) с комбинацией 20 / 7 мл агара, омываемого 40 / 20 мл бульона. Бульонные среды богаты факторами роста, что позволяет выращивать как факультативные, так и облигатные анаэробы, вызывающие бактериемию. Специальный пептон является источником различных аминокислот, дрожжевой экстракт – витаминов, а гемин и НАД являются факторами роста таких прихотливых микроорганизмов, как Haemophilus spp. Комбинированная среда рекомендуется для получения быстрого роста энтеробактерий, псевдомонад, стафилококков, стрептококков и грибов Candida.
|
LQ034A (флакон предназначен для взрослых анализов) Комбинация плотной (20 мл) и жидкой фазы (40 мл) для выделения дрожжевых и плесневых грибов из клинического материала. |
FD169A рекомендуется для селективного выделения патогенных грибов. |
LQ034 (флакон предназначен для детских анализов) Комбинация плотной (7 мл) и жидкой фазы (20 мл) для выделения дрожжевых и плесневых грибов из клинического материала. |
FD169B рекомендуется для селективного выделения патогенных грибов. |
№ по каталогу
|
Питательная среда (70 мл для взрослых; 20 мл для детей)
|
LQ003 (флакон предназначен для детских анализов)
LQ003A (флакон предназначен для взрослых анализов) |
BHI - Brain Heart Infusion
Cердечно-мозговая вытяжка (бульон) |
LQ004 (флакон предназначен для детских анализов)
LQ004A (флакон предназначен для взрослых анализов) |
BHI - Supplemented w/ 0.05% SPS
Cердечно-мозговая вытяжка (бульон) с 0,05% СПС |
LQ006 (флакон предназначен для детских анализов)
LQ006A (флакон предназначен для взрослых анализов) |
Columbia Broth
Колумбийский бульон |
LQ010 (флакон предназначен для детских анализов)
LQ010A (флакон предназначен для взрослых анализов) |
Glucose Broth Supplemented w/ 0.05% SPS
Сахарный бульон с 0,05% СПС |
LQ009 (флакон предназначен для детских анализов)
LQ009A (флакон предназначен для взрослых анализов) |
TSB - Tryptone Soya Broth
Триптон-соевый бульон |
LQ011 (флакон предназначен для детских анализов)
LQ011A (флакон предназначен для взрослых анализов) |
TSB - Tryptone Soya Broth w/ 0.05% SPS
Триптон-соевый бульон с 0,05% СПС |
LQ005 (флакон предназначен для детских анализов)
LQ005A (флакон предназначен для взрослых анализов) |
TSB - Tryptone Soya Broth w/ 10% Sucrose
Триптон-соевый бульон с 10% сахарозой |
№ по каталогу
|
Питательная среда (70 мл для взрослых; 20 мл для детей)
|
LQ008 (флакон предназначен для детских анализов)
LQ008A (флакон предназначен для взрослых анализов) |
Schaedler Broth
Бульон Шадлера |
LQ007 (флакон предназначен для детских анализов)
LQ007A (флакон предназначен для взрослых анализов) |
Thioglycollate Broth
Тиогликолевый бульон |
LQ023 (флакон предназначен для детских анализов)
LQ023A (флакон предназначен для взрослых анализов) |
Thioglycollate Broth w/ 0.05% SPS
Тиогликолевый бульон с 0,05% СПС |
LQ013 (флакон предназначен для детских анализов)
LQ013A (флакон предназначен для взрослых анализов) |
Hartley Broth
Бульон Хартли |
LQ095 (флакон предназначен для детских анализов)
LQ095A (флакон предназначен для взрослых анализов) |
Hartley Broth w/ 0.05% SPS
Бульон Хартли с 0,05% СПС |
LQ014 (флакон предназначен для детских анализов)
LQ014A (флакон предназначен для взрослых анализов) |
Modified Wilkins Chalgren Broth
Модифицированный бульон Вилкинса-Чалгрена |
Примечание:
Объем бульона в однофазных системах составляет 20 мл для детских анализов и 70 мл – для взрослых анализов.
Флаконы со средами для аэробов комплектуются специальными иглами с воздушным фильтром.
Состав сред **
Ингредиенты ( г/л) |
Сердечно-мозговой бульон. |
Сердечно-мозговой |
Триптон-соевый |
Колумбийский бульон |
Триптон-соевый бульон |
Сахарный бульон |
Триптон-соевый |
Экстракт мозга теленка (*вытяжка, порошок) |
20,0
|
20,0 | |||||
Экстракт сердца теленка (*вытяжка, порошок) |
25,0
|
25,0 | |||||
Протеозопептон |
10,0
|
10,0 | |||||
Натрия гидрофосфат |
2,5
|
2,5 | |||||
Натрия полианетол сульфонат (SPS) |
-
|
0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,25 | 0,5 | 0,5 |
Натрия хлорид |
5,0
|
5,0 | 5,0 | 5,0 | 5,0 | 5,0 | 5,0 |
Глюкоза |
2,0
|
2,0 | 2,5 | 2,5 | 2,5 | 5,0 | 2,5 |
Ферментативный гидролизат казеина | 17,0 | 10,0 | 17,0 | ||||
Папаиновый перевар соевой муки | 3,0 | 3,0 | 3,0 | ||||
Дрожжевой экстракт |
2,5
|
2,5 | 2,5 | ||||
Сахароза | 100,0 | ||||||
Калия гидрофосфат | 2,5 | 2,5 | 2,5 | ||||
Гемин | 0,005 | 0,005 | 0,005 | ||||
Пептон специальный | 10,0 | ||||||
Биопептон | 8,0 | ||||||
Трис-буфер | 3,7 | ||||||
L-Цистеина гидрохлорид | 0,5 | ||||||
Магния сульфат | 0,5 | ||||||
Железа сульфат | 0,02 | ||||||
Гидролизат казеина | 17,0 | ||||||
Конечное значение pH (при 25°C) | 7.4 ± 0.2 | 7.4 ± 0.2 | 7.3 ± 0.2 | 7.5 ± 0.2 | 7.3 ± 0.2 | 7.3 ± 0.2 | 7.3 ± 0.2 |
*Экстракт мозга теленка (вытяжка, порошок) - эквивалент 200 мл настоя мозга теленка; |
Примечания: хранить при +2…8°C; *SPS – натрия полианетолсульфонат; ** состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам.
Состав сред **
Ингредиенты (г/л)
|
Тиогликолевый бульон
LQ007A (70 мл) LQ007 (20 мл) |
Бульон Шадлера
LQ008A (70 мл) LQ008 (20 мл) |
Бульон Хартли
LQ013A (70 мл) LQ013 (20 мл) |
Бульон
Вилкинса-Чалгрена модифицированный LQ014A (70 мл) LQ014 (20 мл) |
Ферментативный гидролизат казеина
|
15,0
|
7,5
|
|
10,0
|
Дрожжевой экстракт
|
5,0
|
5,0
|
|
5,0
|
Глюкоза
|
5,0
|
|
|
1,0
|
Натрия хлорид
|
2,5
|
1,6
|
|
5,0
|
L-Цистин
|
0,5
|
0,14
|
|
|
Натрия тиогликолят
|
0,5
|
|
|
|
Натрия полианетолсульфонат
|
0,5
|
0,5
|
|
0,5
|
Папаиновый перевар соевой муки
|
|
1,0
|
|
|
Протеозопептон
|
|
2,5
|
|
|
Глюкоза
|
|
6,5
|
|
|
Трис-буфер
|
|
3,0
|
|
|
Натрия хлорид
|
|
|
|
|
Калия гидрофофсфат
|
|
0,2
|
|
|
Гемин
|
|
0,01
|
|
0,005
|
Триптический перевар сердечной мышцы
|
|
|
29,0
|
|
Пептон
|
|
|
|
10,0
|
L-Аргинин
|
|
|
|
1,0
|
Натрия пируват
|
|
|
|
1,0
|
Менадион
|
|
|
|
0,0005
|
Конечное значение pH (при 25°C)
|
7.2 ± 0.2
|
7.6± 0.2
|
7.3 ± 0.2
|
7.3 ± 0.2
|
Примечания: хранить при +2…8°C; ** состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам.
1. Засеять среду, как описано для системы HiSafe.
2. Инкубировать при 35± 2° С в течение 4-6 ч. Наклонить систему так, чтобы поверхность агара была смочена бульоном.
НЕ ВСТРЯХИВАТЬ СИСТЕМУ И НЕ ДЕРЖАТЬ В НАКЛОННОМ ПОЛОЖЕНИИ БОЛЕЕ 15 СЕКУНД.
3. Придать системе вертикальное положение и инкубировать при 35± 2° С в течение 18-24 ч или дольше (при необходимости).
4. Для выделения культур аэробов можно применять аэраторы, как это описано для системы HiSafe.
ДВУХФАЗНЫЕ СИСТЕМЫ ДЛЯ САЛЬМОНЕЛЛ
Простое, Быстрое и Достоверное определение сальмонелл в течение 24 часов
Диагностика заболеваний, вызванных сальмонеллами, рутинными методами обычно занимает 3-4 дня. В первый день материал засевают в тетратионатный или селенитовый бульон. На второй день обогащенную культуру рассевают на Дезоксихолат-цитратном агаре или Ксилозо-лизиновом дезоксихолатном агаре. Затем выросшие подозрительные колонии отбирают и идентифицируют, определяя у чистой культуры уреазную активность и другие биохимические свойства на дифференциальных средах.
В настоящее время компания HiMedia предлагает быструю тест-систему, которая всего лишь за 24 ч позволяет определить возбудителя инфекции. Предлагаемая комбинация питательных сред позволяет проводить обогащение, получать и идентифицировать колонии в течение 24 ч. Ниже представлены различные комбинации таких сред.
1.Подписывают флакон с двухфазной средой.
2.Для выделения гемокультуры: а) Крышку флакона не отвинчивать! Удаляют только верхнюю часть крышки; б) Дезинфицируют открывшуюся часть резиновой пробки; в) Стерильной (одноразовой) иглой и шприцем берут кровь больного общепринятым методом; г) Немедленно переносят кровь во флакон с питательной средой, прокалывая резиновую пробку той же иглой. В случае задержки посева исследуемую кровь оставляют при комнатной температуре.
3.Для другого материала (испражнения, моча, рвотные массы, синовиальная жидкость, гной): засевают непосредственно в жидкую фазу системы, соблюдая правила асептики.
4. Инкубируют засеянные флаконы при 37°С 4-5 ч.
5. Наклоняют флакон на несколько секунд, чтобы засеять таким образом обогащенную в бульоне культуру на поверхность агара.
После инкубирования на поверхности агара вырастают черные колонии, бесцветные колонии дают только сальмонеллы серовара Paratyphi A.
|
Двухфазная система HiCombi для сальмонелл
Слева - незасеянная система, справа - колонии сальмонелл (Salmonella enterica ssp. enterica) на агаре Гектоен энтерик после 24-часового инкубирования засеянной крови |
Двухфазные среды для культивирования сальмонелл выпускаются в двух варианатах – для взрослых и для детей
*Двухфазные системы (флакон предназначен для детских анализов):
жидкая фаза - 7 мл
твердая фаза - 20 мл в одном флаконе
|
*Двухфазная система (флакон предназначен для взрослых анализов):
жидкая фаза - 20 мл
твердая фаза - 40 мл в одном стеклянном флаконе
|
LQ031 Двухфазная система ХайКомби для сальмонелл - DCA
на основе Дезоксихолат-цитратного агара для качественного теста на присутствие сальмонелл; жидкая фаза неселективна |
LQ031A Двухфазная система ХайКомби для сальмонелл - DCA
на основе Дезоксихолат-цитратного агара для качественного теста на присутствие сальмонелл; жидкая фаза неселективна |
LQ032 Двухфазная система ХайКомби для сальмонелл - HEA
на основе агара «Гектоен энтерик» для качественного теста на присутствие сальмонелл; жидкая фаза неселективна |
LQ032A Двухфазная система ХайКомби для сальмонелл - HEA
на основе агара «Гектоен энтерик» для качественного теста на присутствие сальмонелл; жидкая фаза неселективна |
LQ029 Двухфазная система ХайКомби для сальмонелл - SS
на основе агара Сальмонелла-Шигелла для качественного теста на присутствие сальмонелл; жидкая фаза неселективна |
LQ029A Двухфазная система ХайКомби для сальмонелл - SS
на основе агара Сальмонелла-Шигелла для качественного теста на присутствие сальмонелл; жидкая фаза неселективна |
LQ030 Двухфазная система ХайКомби для сальмонелл - XLD
на основе Ксилозо-лизинового дезоксихолатного (КЛД) агара для качественного теста на присутствие сальмонелл; жидкая фаза неселективна |
LQ030A Двухфазная система ХайКомби для сальмонелл - XLD
на основе Ксилозо-лизинового дезоксихолатного (КЛД) агара для качественного теста на присутствие сальмонелл; жидкая фаза неселективна |
LQ035 Двухфазная селективная система ХайКомби - HEA
на основе среды «Гектоен энтерик» для качественного теста на присутствие сальмонелл; обе фазы селективны |
LQ035A Двухфазная селективная система ХайКомби - HEA
на основе среды «Гектоен энтерик» для качественного теста на присутствие сальмонелл; обе фазы селективны |
LQ036 Двухфазная селективная система ХайКомби - SS
на основе среды Сальмонелла-Шигелла для качественного теста на присутствие сальмонелл; обе фазы селективны |
LQ036A Двухфазная селективная система ХайКомби - SS
на основе среды Сальмонелла-Шигелла для качественного теста на присутствие сальмонелл; обе фазы селективны |
Примечание: *все системы для гемокультуры хранят при 15–22°С
двухфазные системы LQ012 и LQ033 комплектуются иглами-аэраторами LA038
Кат. №
|
Наименование
|
Назначение
|
LА038
|
HiAerator Needles
Металлические иглы для аэрации - Аэраторы |
для аэрации флаконов с рядом сред HiMedia, используемых с целью выделения гемокультуры. представляет собой стерильную металлическую иглу для аэрации флаконов с гемокультурами (двухфазные системы ХайКомби LQ012 и LQ033 комплектуются аэраторами )
|
Штативы под флаконы для выделение гемокультуры
| ||
---|---|---|
LA278
|
Combi System S.S. Rack
Штатив для флаконов с двухфазными средами ХайКомби |
для 8 флаконов с двухфазными средами ХайКомби (нержавеющая сталь)
|
LA279
|
Safe Blood Culture Bottle S.S. Rack
Штатив для флаконов со средами ХайСейф |
для 8 флаконов со средами ХайСейф (нержавеющая сталь)
|
PW070
|
Combi System Plastic Rack
Штатив для флаконов с двухфазными средами ХайКомби |
Пластмассовый штатив (толщина 4 мм) для 8 флаконов с двухфазными средами ХайКомби
|
PW071
|
Safe Blood Culture Bottle Plastic Rack
Штатив для флаконов со средами ХайСейф |
Пластмассовый штатив (толщина 4 мм) для 8 флаконов со средами ХайСейф
|
SS024
|
Штатив для флаконов со средой HiCombi
|
для 8 флаконов с двойной средойHiCombi.
|
SS025
|
Штатив для флаконов со средой HiSafe
|
для 8 флаконов HiSafe
|
PW084
|
Штатив для флаконов со средой HiCombi
|
для 8 флаконов с двойной средойHiCombi (штатив толщиной 4 мм)
|
PW085
|
Штатив для флаконов со средой HiSafe
|
для 8 флаконов HiSafe (штатив толщиной 4 мм)
|