|
Эти хромогенные среды рекомендуются для презумптивной идентификации и подтверждения микроорганизмов, вызывающих в основном инфекции мочевыводящих путей. Дифференциации энтеробактерий из мочи и других субстратов, которые могут содержать большое количество протеев и других условно-патогенных бактерий. Особые характеристики этих сред позволяют использовать их вместо агара МакКонки.
|
Рост на среде HiCrome UTI Agar (M1353): Enterococcus faecalis (мелкие синие-зелёные), Pseudomonas aeruginosa (бесцветные), Staphylococcus aureus (золотисто-желтые), Kelbsiella pneumoniae (сине-фиолетовые, слизистые) и Escherichia coli (розовые или красные)
|
|
Рост на среде HiCrome UTI Agar (M1353RС): Enterococcus faecalis (голубой), Pseudomonas aeruginosa (янтарь), Staphylococcus aureus (белый крем), Klebsiella pneumoniae (темно-синий) и Escherichia coli (розовый)
|
|
Рост на среде HiCrome UTI Agar, Modified (M1418): Escherichia coli (розовые или красные), Pseudomonas aeruginosa (бесцветные), Enterococcus faecalis (мелкие сине-зелёные), Proteus mirabilis (светло-коричневые) и Kelbsiella pneumoniae (сине-фиолетовые, слизистые)
|
Состав*:
Ингредиенты
|
M1353RС грамм/литр |
M1353 грамм/литр
|
M1418 грамм/литр
|
Смесь пептонов |
16,00 |
- |
- |
Пептон специальный (содержащий триптофан и фенилаланин)
|
- |
15,00
|
-
|
Триптофан |
2,00 |
- |
- |
Пептический перевар животной ткани
|
- |
-
|
18,00
|
Хромогенный субстрат |
0,50 |
- |
- |
Ферментативный гидролизат казеина
|
- |
-
|
4,00
|
Говяжий экстракт
|
- |
-
|
6,00
|
Хромогенная смесь
|
- |
2,45
|
12,44
|
Фактор роста |
13,00 |
- |
- |
Агар-агар
|
16,00 |
15,00
|
15,00
|
Конечное значение рН (при 25°С)
|
7,2 ± 0.2 |
6,8 ± 0.2
|
7,2 ± 0.2
|
*Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам
Приготовление:
Размешать 47,5 г порошка M1353RC или 32,45 г M1353 или 55,44 г порошка M1418 в 1000 мл дистиллированной воды. Осторожно прокипятить для полного растворения частиц. Стерилизовать автоклавированием при 1,1 атм (121°С) в течение 15 мин. Остудить до 45-50°С. Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.
Принцип и оценка результата:
Инфекции мочевыводящих путей — это бактериальные инфекции, поражающие части мочевыводящих путей. Общими симптомами инфекции мочевыводящих путей являются позывы к мочеиспусканию и частота мочеиспускания с сопутствующим дискомфортом или болью. Распространенным заболеванием является цистит, вызванный инфекцией мочевого пузыря уропатогенными бактериями, которыми чаще всего является E.coli, но иногда Staphylococcus saprophyticus или особенно при внутрибольничных инфекциях, Klebsiella, Proteus mirabilis, другие колиформные бактерии, Pseudomonas aeruginosa или Enterococcus faecalis (1). HiCrome® UTI Agar сформулирован на основе работ, выполненных Pezzlo (2), Wilkie et al (3), Friedman et al (4), Murray et al (5), Soriano and Ponte (6) и Merlino et al (7). HiCrome® UTI Agar (M1353RC) аналогичен M1353 с небольшой разницей в хромогенной смеси для улучшения цветовых характеристик сред. Эти среды рекомендуются для обнаружения патогенов мочевыводящих путей, где HiCrome® UTI Agar имеет более широкое применение в качестве общего питательного агара для выделения различных микроорганизмов. Он облегчает и ускоряет идентификацию некоторых грамотрицательных и некоторых грамположительных бактерий на основе различных контрастных цветов колоний, образующихся в результате реакций ферментов родного или видового типа с двумя хромогенными субстратами. Хромогенные субстраты специфически расщепляются ферментами, вырабатываемыми Enterococcus, кишечной палочкой и колиформными палочками. Наличие в пептоне аминокислот, таких как фенилаланин и триптофан, помогает обнаружить активность триптофандезаминазы, указывая наличие видов Proteus, Morganella и Providencia. Один из хромогенных субстратов расщепляется В-глюкозидазой, которой обладают энтерококки, что приводит к образованию синих колоний. E.coli образует розовые колонии благодаря ферменту B-D-галактозидазе, который расщепляет другой хромогенный субстрат. Дальнейшее подтверждение E.coli может быть сделано путем проведения теста на индол. Колиформные образуют колонии фиолетового цвета из-за расщепления обоих хромогенных субстратов. Колонии Proteus, Morganella и Providencia выглядят коричневыми из-за активности триптофандезаминазы. Пептоновая смесь содержит азотистые, углеродистые соединения и другие необходимые питательные вещества для роста. Эту среду можно сделать селективной путем добавления антибиотиков для обнаружения микроорганизмов, ассоциированных с внутрибольничными инфекциями.
Тип образца: Клинические образцы: моча, кал, образцы продуктов питания, образцы воды. Сбор образцов и работа с ними: Для клинических образцов следуйте соответствующим методам работы с образцами в соответствии с установленными рекомендациями (8,9). Для образцов пищевых продуктов следуйте соответствующим методам сбора и обработки образцов в соответствии с рекомендациями (10). При отборе проб воды следует применять соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с руководящими принципами и местными стандартами (1). После использования загрязненные материалы должны быть стерилизованы путем автоклавирования перед утилизацией. Предупреждения и меры предосторожности: Прочтите этикетку перед открытием контейнера. Надевайте защитные перчатки/защитную одежду/защиту глаз/лицо. Соблюдайте правила микробиологической лаборатории при работе с образцами и культурой. При работе с клиническими образцами следует соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными рекомендациями.
|
Контроль качества:
Внешний вид порошка:
Гомогенный сыпучий порошок светло-желтого цвета.
Плотность готовой среды:
По плотности соответствует 1,6 % агаровому гелю.
Цвет и прозрачность готовой среды:
В чашках Петри формируется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.
Кислотность:
При 25°С 3,24 %-й (вес/об) водный раствор М1353 имеет рН 6,8 ± 0.2, 4,75 %-й (вес/об) водный раствор М1353RC имеет рН 7,2 ± 0.2, а 5,54 %-й (вес/об) водный раствор М1418 - 7,2 ± 0.2.
Культуральные свойства:
Ростовые характеристики референс-штаммов через 24 ч при 35-37°С.
Штаммы микроорганизмов (ATCC) |
Рост
|
Цвет колоний M1353R
|
Цвет колоний M1353 |
Цвет колоний M1418 |
Триптофандезаминаза
|
Индол
|
Escherichia coli (25922)
|
Обильный
|
Розовый
|
Розовые или красные |
Розовые или красные |
-
|
+
|
Proteus mirabilis (12453)
|
Обильный
|
Cветло-коричневый
|
Светло-коричневые |
Светло-коричневые |
+
|
-
|
Klebsiella pneumoniae (13883)
|
Обильный
|
Темно-синий
|
Темно-синие или фиолетовые, мукоидные |
Темно-синие или фиолетовые, мукоидные |
-
|
-
|
Pseudomonas aeruginosa (27853)
|
Обильный
|
Янтарь
|
Бесцветные |
Бесцветные |
-
|
-
|
Staphylococcus aureus (25923)
|
Обильный
|
Белый крем
|
Золотисто-желтые |
Золотисто-желтые |
-
|
-
|
Enterococcus faecalis (29212)
|
Обильный
|
Голубой
|
Синие, мелкие |
Синие, мелкие |
-
|
-
|
Klebsiella aerogenes (13048) |
Обильный
|
Темно-синий |
Синие, мелкие |
Синие, мелкие |
-
|
-
|
Salmonella Typhi (6539) |
Обильный
|
Янтарь |
Бесцветные |
Бесцветные |
-
|
-
|
Salmonella Typhimurium (14028) |
Обильный
|
Янтарь |
Бесцветные |
Бесцветные |
-
|
-
|
Примечание: “+” положительная реакция; “-” отрицательная реакция.
Ссылки:
- Lipps WC, Braun-Howland EB, Baxter TE,eds. Standard methods for the Examination of Water and Wastewater, 24th ed. Washington DC:APHA Press; 2023.
- Pezzlo M., 1998, Clin. Microbiol. Rev., 1:268-280.
- Wilkie M. E., Almond M. K., Marsh F. P., 1992, British Medical Journal 305:1137-1141.
- Friedman M. P. et al, 1991, J. Clin. Microbiol., 29:2385-2389.
- Murray P., Traynor P. Hopson D., 1992, J. Clin. Microbiol., 30:1600-1601.
- Soriano F., Ponte C., 1992, J. Clin. Microbiol., 30:3033-3034.
- Merlino et al, 1995, Abstr. Austr. Microbiol. 16(4):17-3.
- Isenberg, H.D. Clinical Microbiology Procedures Handbook 2nd Edition.
- Jorgensen, J.H., Pfaller, M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M.L., Richter, S.S and Warnock., D.W. (2015), Manual of Clinical Microbiology, 11th Edition. Vol. 1.
- Salfinger Y., and Tortorello M.L., 2015, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 5th Ed., American Public Health Association, Washington, D.C.
Хранение и срок годности:
Хранить при температуре 15-25°C в плотно закрытом контейнере, а подготовленную среду - при температуре 2-8°C. Используйте до истечения срока годности, указанного на этикетке. При вскрытии продукт следует правильно хранить в сухом виде, плотно укупоривая контейнер, чтобы не допустить образования комков из-за гигроскопичности продукта. Неправильное хранение продукта может привести к образованию комков. Хранить в сухом, проветриваемом помещении, защищенном от перепадов температур и источников открытого пламени. Плотно закройте контейнер после использования. Эксплуатационные характеристики продукта наилучшие при использовании в течение указанного срока годности.
|
Утилизация:
Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию путем автоклавирования и/или сжигания использованных или непригодных для использования препаратов данного продукта. Следуйте установленным лабораторным процедурам при утилизации инфекционных материалов, а материал, вступающий в контакт с клиническим образцом, должен быть обеззаражен и утилизирован в соответствии с существующими лабораторными методами.
|