Middlebrook 7H11 Agar Base
Основа агара Миддлбрука 7H11
M511
Middlebrook 7H11 Agar Base without Malachite Green
Основа агара Миддлбрука 7H11 без малахитового зеленого
M511А

 

Основа агара Миддлбрука 7Н11 с добавкой рекомендуется для выделения, культивирования и тестирования чувствительности микобактерий.

Состав**:

Ингредиенты
M511
грамм/литр
M511A
грамм/литр
Ферментативный гидролизат казеина
1,00
1,00
Аммония сульфат
0,50
0,50
L-Глутаминовая кислота
0,50
0,50
Калия дигидрофосфат
1,50
1,50
Натрия гидрофосфат
1,50
1,50
Натрия сульфат
0,40
0,40
Железа аммонийного цитрат
0,04
0,04
Магния сульфат
0,05
0,05
Пиридоксин
0,001
0,001
Биотин
0,0005
0,0005
Малахитовый зеленый
0,001
Агар-агар
15,00
15,00
Конечное значение рН (при 25°С) 6,6 ± 0,2
 
 

** Состав выверен и доведен до соответствия необходимым параметрам

Приготовление:

Размешать 10,25 г порошка в 450 мл дистиллированной воды, содержащей 2,5 мл глицерина. Прокипятить до полного растворения компонентов среды. Стерилизовать автоклавированием при 1 атм (1210С) в течении 15 мин. Охладить до 500С. Асептически добавить содержимое одного флакона добавки FD018 (Middlebrook OADC Growth Supplement).

Принцип и оценка результата:

Среда 7Н11 является модификацией среды 7Н10 (1). Кон (2) показал, что добавление гидролизата казеина существенно улучшает рост большинства штаммов M.tuberculosis и особенно помогает при определении чувствительности к противотуберкулезным препаратам (3).

Среда содержит много неорганических ионов, способствующих росту микобактерий. Глицерин является источником углерода и энергии.

Добавка OADC (FD018) содержит олеиновую кислоту, альбумин, хлорид натрия, глюкозу и каталазу. Олеиновая кислота и другие высокомолекулярные жирные кислоты метаболизируются микобактериями, глюкоза используется как источник энергии. Каталаза нейтрализует токсическое воздействие перекисей, альбумин предохраняет туберкулезные бациллы от влияния других токсичных агентов. Малахитовый зеленый частично ингибирует сопутствующую флору.

Контроль качества:

Внешний вид порошка:

Гомогенный сыпучий порошок светло-зеленого (М511) и желтого (М511А) цвета.

Плотность готовой среды:

Образуется среда, соответствующая по плотности 1,5% агаровому гелю.

Цвет и прозрачность готовой среды:

Светлого янтарного цвета, слегка опалесцирующий гель с зеленоватым оттенком.

Кислотность среды:

При 250С водный раствор (2,05% вес/об), содержащий 0,5% глицерина, имеет pH 6,6+0,2.

Культуральные свойства:

Ростовые характеристики референс-штаммов через 2-4 недели при 35-37°С.

Штаммы микроорганизмов (АТСС)
Рост
M.tuberculоsis H37 Rv (25618) 
Обильный
или хороший
M.smegmatis (14468) 
Обильный
или хороший
M.fortuitum (6841)
Обильный
или хороший

Ссылки:

1.Middlebrook and Cohn, 1958, Am. J. Public Health, 48:844.
2.Cohn et al, 1968, Am. Rev. Resp. Dis., 98:295.
3.MacFaddin J.F., 1985, Media for Isolation-Cultivation-Maintenance of Medical Bacteria, Vol.1, Williams and Wilkins, Baltimore.

Условия и сроки хранения:

Порошок хранить при температуре ниже 25°С. Использовать до даты, указанной на этикетке. Готовую среду хранить при температуре 2…8°С.